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TIRF成像
TIRF物镜和Ixplore TIRF

用于TIRF的高分辨率物镜

高数值孔径(NA)对于TIRF显微成像非常重要。作为TIRF成像领域的领军企业,奥林巴斯提供多种规格的高NA系列物镜,NA值从1.45到全球最高的1.7*1 放大倍率从60倍到150倍。现代显微成像方法,例如利用sCMOS相机进行超高分辨大视野成像时,需要高品质物镜。这就是我们研发先进物镜生产技术的原因。这种先进的抛光技术,使得我们能够创造出世界上首款NA为1.5*2 的平场校正复消色差物镜。该系列物镜在大视野下依然能够提供优秀的平场图像,是TIRF成像的理想工具。

*1 根据奥巴斯公司的研究,到2018年11月为止。
*2 根据奥巴斯公司的研究,到2018年11月为止。

Total Internal Reflection Fluorescence (TIRF) Objectives

长时程TIRF成像,观察质膜与FBP17蛋白之间的聚合与解聚作用。

利用高数值孔径物镜,调节TIRF成像深度,获得高信噪比图像。
TIRF成像有助于细胞生物学研究。这幅图片展示了细胞膜形态和分子动力学的变化。物镜:UAPON100XOTIRF。*4
*4 UPLAP0100XOHR的前代型号

图像来源: Kazuya Tsujita, Ph.D., Toshiki Itoh, Ph.D., Biosignal Research Center, Organization of Advanced Science and Technology, Kobe University Reference: Nat Cell Biol. 2015 Jun; 17 (6): 749–58. doi: 10.1038/ ncb3162.

更多地了解TIRF物镜

单分子荧光成像,计数跨膜离子通道复合体的亚单位(APON100XHOTIRF)

得益于1.70的数值孔径,该物镜使得单分子TIRF成像分辨率更高,图像更明亮。

亚单位计数*5 该技术用于分析Kv4.2-DPP10复合物中辅助二肽基肽酶样蛋白10(DPP10)分子的数量,该分子可联结到跨膜离子通道Kv4.2。APON100XHOTIRE物镜的高NA值,使得研究人员能够测量由单分子漂白导致的荧光强度变化。本次研究*显示,DPP10亚单位中最多4个分子形成具有离子通道Kv4.2的复合物。

*5 Ulbrich, MH, and Isacoff EY. “Subunit counting in membrane–bound proteins.” Nature Methods, 4 (2007): 319–321.
*6 Kitazawa M, Kubo Y, and Nakajo K. “Kv4.2 and accessory dipeptidyl peptidase–like protein 10 (DPP10) subunit preferentially form a 4:2 (Kv4.2:DPP10) channel complex.” J Biol Chem, 290 (2015): 22724–22733.

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通过亚单位计数来确定Kv4.2-DPP10管道复合物的亚单位化学计量

使用单分子荧光成像的跨膜离子管道复合物亚单位计数示意图

TIRF物镜选择指南

工作距离
(mm)
放大倍率 物镜视场数*3 数值孔径 介质 应用
UPLAPO60XOHR 0.11 60X 22 1.50 活细胞的实时超分辨率成像 / 微结构,比如细胞器的超分辨率成像 / 全细胞TIRF成像
UPLAPO100XOHR 0.12 100X 22 1.50 活细胞的实时超分辨率成像 / 微结构,比如细胞器的超分辨率成像 / 细胞膜或亚细胞器的高分辨率成像,以及单分子水平实验
APON100XHOTIRF 0.08 100X 22 1.70 特殊油 从单分子层面观察蛋白质或囊泡的移动
UAPON150XOTIRF 0.08 150X 22 1.45 亚细胞成像(例如细胞器、内质网和细胞内囊泡运输)

*3 通过目镜可观察到的最大场数。

相关产品

IXplore TIRF

IXplore TIRF

  • 利用奥林巴斯实时控制器,在活细胞相关实验中可减少光毒性和细胞损伤
  • 可灵活搭载多种活细胞培养系统,成像时依然保持细胞活力
  • 采用奥林巴斯硬件自动对焦系统(Z轴漂移补偿),在长时程实验中可精确稳定地锁住焦面
  • 奥林巴斯硅油物镜,有助于标本深层成像,避免发生形变

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*标识图像:提供方: Dr. Michael W. Davidson The Florida State University

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