Life Science Solutions
应用资料

量化衍生后iPS细胞集落的融合度


诱导多能干(iPS)细胞,由于其潜在应用而继续处于再生医学和药物发现研究的前沿。针对研究目的维持、生长和准备iPS细胞的工作流程涉及许多过程。改进此类流程以提高效率和减轻细胞死亡对于推进所有干细胞相关研究均至关重要。干细胞研究虽然相对较新,但在很大程度上依赖于操作员的经验和技能,这意味着人为错误在集落功效中起着重要作用。指示iPS细胞融合度是优化集落,分化和获得可再现结果的有用工具。

iPS细胞研究示例

iPS细胞研究示例

解决方案

图1.iPS细胞集落的图像(左)和融合度测量结果(右)图1.iPS细胞集落的图像(左)和融合度测量结果(右)


在iPS细胞培养维持过程中使用奥林巴斯 CKX53组织培养显微镜获得多个图像,让CKX-CCSW软件能够提供准确的融合度数据。在六天时间内,分别在6孔板的不同位置拍摄三张、六张和十张图像。这些图像被导入到CKX-CCSW软件中,其中首先标出了细胞和背景(图1)。

从这里开始,在整个图像中以蓝色和绿色显示细胞和背景,并计算所有图像的融合度。在使用三张、六张和十张图像时,在第一天、第三天和第六天计算平均融合度和标准差。尽管所使用的图像数量发生了显著变化,但图2显示即使使用少量图像也可以生成准确的生长曲线。

图2.使用CKX-CCSW软件记录iPS细胞的集落变化、融合度
图2.使用CKX-CCSW软件记录iPS细胞的集落变化、融合度
 

图3.iPS细胞集落融合的生长曲线(集落的3张图像) 所使用的设备和软件:奥林巴斯 CKX53显微镜,DP22相机,CKX-CCSW软件
物镜:PLN2X(NA 0.06,WD 5.8 mm)观察方法:明场
容器:6孔板
细胞:无滋养层的iPS细胞
由iPS PORTAL Inc.提供。

图3.iPS细胞集落融合的生长曲线(集落的3张图像)

结论

与CKX53显微镜结合使用时,奥林巴斯 CKX-CCSW软件让您能够测量和记录iPS细胞集落的融合度,无需从培养皿上刮擦iPS细胞集落,实现有效融合。本应用指南以iPS细胞的维持培养过程为例,介绍了在使用100 mm培养皿和24孔板提取iPS细胞后,可在诸多维持培养过程中获得无人为差异性的数据。其还可通过记录和存储定量数据,支持高度可重复的细胞培养过程。

Products used for this application

细胞融合度检查软件

CKX-CCSW

  • 测量未染色的培养细胞和融合度
  • 降低污染风险
  • 操作快速简便
  • 优化细胞培养过程
  • 提高定量分析质量
紧凑且符合人体工学的细胞培养解决方案设计

CKX53

  • 无需对中的简单相衬
  • 反相相衬(IVC)技术可提供清晰三维观察。
  • 带有3档位滑块选项的荧光

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