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对显微镜进行简单升级即可实现稳定的活细胞成像

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稳定的活细胞成像

您是否需要进行长时间活细胞或模式生物研究,但不确定旧款倒置科研级显微镜能否胜任?购买新倒置显微镜是否超出您当前的预算?您可能会惊奇地发现,只需进行少量关键性改造,您现有显微镜仍然可以帮助您实现目标。

除了我们显微镜改进系列第1部分第2部分讨论过的升级之外,添加环境控制室即可帮助您实现颇具挑战的实时成像研究目标。

环境控制对稳定活细胞成像的重要性

活细胞成像可能需要花费20分钟,几个小时甚至更长时间。除了由于实验时间较长导致与室温变化有关的Z轴漂移外,您可能还需要控制以下方面:

  • 温度(最高37°C [99°F]或最低22°C [72°F])
  • 湿度
  • CO 2 (如果需要低氧条件,则为O2

显微镜的环境控制可以配置为包括所有这些功能或其中之一,轻松将其升级用于各种活细胞和模型生物成像应用。

载物台台上式装置的好处

诸如Tokai Hit和Okolab等载物台台上式系统可以提供方便可移动的腔室单元。这样就可以根据需要,添加和解除环境控制。当仪器也被用于不要求进行活细胞成像的应用时,该系统特别方便。

而且,这类系统对于在数小时甚至数天内保持活力是非常有效的。可以通过灌注口补充水和介质增加湿度和营养/激动剂,并且溶液加热器可以尽可能降低温度变化影响。

另外还要注意,浸没式物镜在与样品接触时起到散热的作用,因此使用这类光学元件可能需要增加物镜加热器。

用于活细胞成像的显微镜外罩

另一个选择是完整的显微镜培养外罩。尽管从显微镜上拆下外罩并不轻松,但与载物台台上式腔室相比,其可以在更大的范围内对环境进行控制。

这类外罩空间大到足以容纳流体分配装置,并可提供稳定的温度环境。由于频繁的热/冷循环会加快显微镜组件磨损,因此其对样品和显微镜都有好处。许多制造商都提供在外罩内保持黑暗环境的遮光型号产品,因而无需单独的显微镜室。

室内环境变化对时间序列成像的影响

特别需要注意的是,大多数显微镜细胞培养系统的校准温度均为25°C。部分系统能够精确监控温度并进行快速温度校正。即便如此,最好还是要避免将仪器放置在容易发生热变化的地点。切忌将仪器放置在通风口下方,如果难以避免,可使用挡板引导气流避开显微镜。

最后,确保显微镜远离诸如离心机、冰箱、冰柜等大型设备,以及远离经常使用的门。这些因素都会为您的时间序列成像实验增加振动伪像。气动防振工作台确实可以帮助隔离仪器,但无论如何最好还是避开成像实验的振动干扰风险。

充分发挥您的显微镜潜力

是否想要了解更多显微镜改进技巧?阅读本系列的第1部分和第2部分可以了解实现有效活细胞成像的其他方面系统更新。您可以点击此处阅读:

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生命科学显微镜高级销售专员

Craig Rappaport是奥林巴斯生命科学部门的高级显微镜销售代表。他在显微镜销售行业从业26年,积累了多年的科学技术营销经验。Craig在加州大学圣塔芭芭拉分校获得文学学士学位,并在杜克大学富夸商学院获得MBA学位。他于2009年加入奥林巴斯,并专注于市场分析、客户之声收集和新产品研究。自2012年以来,他一直在覆盖南加州圣地亚哥和帝国县的销售团队工作。

2021年1月18日
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